紫外可見分光光度計(jì)是根據(jù)物質(zhì)分子對(duì)波長為200~760nm的電磁波的吸收特性所建立起來的一種定性、定量和結(jié)構(gòu)分析儀器。操作簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確度高、重現(xiàn)性好。波長長的光線能量小,波長短的光線能量大。
在紫外可見分光光度計(jì)中,常見的光源有氙燈和鎂燈等,而樣品的光譜則可以通過單光束模式或雙光束模式進(jìn)行測(cè)量。具體來說,單光束模式指的是光線經(jīng)過樣品后直接進(jìn)入光譜儀進(jìn)行測(cè)量,而雙光束模式則是將光線分成兩束,一束經(jīng)過樣品,另一束則經(jīng)過一個(gè)空白的參比通道,再將兩種光線的吸光度進(jìn)行比較。此外還可以選擇不同的檢測(cè)器,如光電離檢測(cè)器和光電二極管檢測(cè)器等,以便對(duì)不同波長范圍的光進(jìn)行測(cè)量和分析。
在使用紫外可見分光光度計(jì)時(shí),需要注意以下一些操作技巧:
1、樣品的制備:樣品的制備要仔細(xì)、準(zhǔn)確,避免出現(xiàn)誤差。通常需要準(zhǔn)確稱量或配制樣品,以保證測(cè)量的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。
2、波長的選取:在選擇測(cè)量波長時(shí),應(yīng)根據(jù)樣品的性質(zhì)和需要進(jìn)行選擇,避免測(cè)量范圍過寬或過窄。
3、參比溶液的配制:在使用雙光束模式時(shí),需要準(zhǔn)備空白參比溶液,以便和樣品進(jìn)行比較。參比溶液應(yīng)根據(jù)樣品性質(zhì)選擇適當(dāng)?shù)娜軇┖筒ㄩL。
4、光路的調(diào)整:在使用單光束模式時(shí),需要調(diào)整光路,使光線準(zhǔn)確進(jìn)入光譜儀。此外,還需要調(diào)整光強(qiáng)、波長、積分時(shí)間等參數(shù),以確保測(cè)量的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。