分光光度計的類型及常用波長有哪些
更新時間:2024-08-06 點擊次數:4269
分光光度計有哪幾種不同的分類方式:
1.分光光度計按照波長及應用領域的不同可以分為:(1)可見光分光光度計:測定波長范圍為400~760nm的可見光區;(2)紫外分光光度計:測定波長范圍為200~400nm的紫外光區;(3)紅外分光光度計:測定波長范圍為大于760nm的紅外光區;(4)熒光分光光度計:用于掃描液相熒光標記物所發出的熒光光譜;(5)原子吸收分光光度計:光源發出被測的特征光譜輻射,被經過原子化器后的樣品蒸氣中的待測元素基態原子所吸收,通過測定特征輻射被吸收的大小,來求出被測元素的含量。
2.分光光度計按自動化程度分類:可分為手動、半自動、自動分光光度計。
3.分光光度計按軟件可分為:帶掃描、不帶掃描。
1.分光光度計核酸的定量
核酸的zui高吸收峰的吸收波長260nm。利用260nm的波長可以定量測量溶于緩沖液的寡核苷酸,單鏈、雙鏈DNA,以及RNA的濃度。
除了核酸濃度,分光光度計同時顯示幾個非常重要的比值表示樣品的純度。如A260/A280的比值,用于評估樣品的純度,因為蛋白的吸收峰是280nm。純凈的樣品,比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8或者2.0,表示存在蛋白質或者酚類物質的影響。
A230表示樣品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,較純凈的核酸A260/A230的比值大于2.0。
A320檢測溶液的混濁度和其他干擾因子。純樣品,A320一般是0。
2.分光光度計蛋白質的直接定量
這種方法是在280nm波長,直接測試蛋白。選擇Warburg公式,光度計可以直接顯示出樣品的濃度,或者是選擇相應的換算方法,將吸光值轉換為樣品濃度。
3.分光光度計細菌細胞密度
細菌培養過程中,需要采用分光光度計準確測定細菌細胞密度。
OD600是追蹤液體培養物中微生物生長的標準方法。在600nm波長下,以未加菌液的培養液作為空白液,測量定量培養后的含菌培養液。